Что обозначает рпга 1 320. Анализ крови рпга: расшифровка результатов

Информация
Содержание
  1. Что такое РПГА и какие имеет особенности
  2. Кто в зоне риска
  3. Рпга анализ крови: что это за исследование, когда назначают, насколько точна расшифровка результатов, какие еще есть тесты на сифилис?
  4. Анализ Крови РПГА — Какие Заболевания Выявляет и 6 Правил Подготовки
  5. Что такое РПГА
  6. Кто в зоне риска
  7. Исследование РПГА для диагностики других инфекций и патологий
  8. Что такое РПГА
  9. Рпга при сифилисе
  10. Где сдать анализ
  11. Исследование РПГА для диагностики других инфекций и патологий
  12. Почему для диагностики сифилиса назначается именно РПГА
  13. Особенности
  14. Описание
  15. Результат
  16. Кто в зоне риска
  17. Как проводится исследование
  18. Насколько анализ достоверен?
  19. Расшифровка результатов
  20. 1. Классификация методов лабораторной диагностики
  21. 1.1. Прямые методы
  22. 1.2. Непрямые методы
  23. 1.3. Гистоморфологические методы
  24. 2. Микроскопия Treponema pallidum в тёмном поле
  25. 3. Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР)
  26. 4. ДНК-гибридизация
  27. 5. Заражение лабораторных животных
  28. 6. Нетрепонемные тесты
  29. 7. Реакция связывания комплемента (РСК, Вассермана, RW)
  30. 8. Реакция микропреципитации
  31. 9. VDRL
  32. 10. РИФ
  33. 11. РИБТ
  34. 12. РПГА
  35. 12.1. Реакция микрогемагглютинации
  36. 13. Иммуноферментный анализ
  37. 14. Иммуноблоттинг
  38. 15. Клиническая оценка результатов лабораторной диагностики сифилиса
  39. 2. Микроскопия Treponema pallidum в тёмном поле
  40. Как расшифровывается РПГА анализ крови и каким образом к нему подготовиться?
  41. 4. ДНК-гибридизация

Что такое РПГА и какие имеет особенности

Реакция пассивной гемагглютинации, используется для расшифровки аббревиатуры РПГА, так и РНГА. Это диагностический тест, применяется для обнаружения растворенного количества антител в образце сыворотки пациента против возбудителей сифилиса. Чтобы быть точным, РПГА помогает в обнаружении антител к аллергену k48 с помощью метода непрямой гемагглютинации.

Процесс включает чувствительность эритроцитов фрагментами Т. палладия. При воздействии на образец сыворотки крови, клетки собираются на поверхности чашки для анализа. Реакция пассивной гемагглютинации относится к специфическим или трепонемным тестам, поскольку в нем используются настоящие, сифилитические антигены.

Тесты очень чувствительны, но, поскольку они неспецифичны, ложноположительные результаты случаются.

Это бывает при внутривенном употреблении наркотиков, беременности, болезни Лайма, некоторых типах пневмонии, малярии, туберкулезе и некоторых аутоиммунных заболеваниях, включая волчанку.

Изучение особенностей иммунного ответа у больных сифилисом требует детального исследования антигенной структуры возбудителя и его влияния на систему органов хозяина.

Ранние признаки, которые могут быть при этом состоянии, включают:

  • одна маленькая безболезненная рана;
  • припухлость в лимфатических узлах возле поражения;
  • не зудящая, кожная сыпь.

Исследование назначается, когда проводится лечение от другой ИППП, такой, как гонорея, если инфицированы ВИЧ, или был половой акт с высоким риском инфицирования. Когда проводилось лечение от сифилиса, рекомендуется провести повторное тестирование, чтобы убедиться, что терапия сработала и инфекция вылечена.

Анализ гемагглютинации Treponema pallidum (РПГА) – это трепонемный тест для серологического диагноза сифилиса, инфекции, передаваемой половым путем, вызванной спирохетой и бледной трепонемой. Основываясь на принципе пассивной гемагглютинации, анализ выявляет антитрепонемные антитела (IgG и IgM) в сыворотке.

Этот важный диагностический тест, используется для обнаружения сифилиса. Это заболевание, передающееся половым путем. Болезнь характеризуется четырьмя стадиями, а именно первичной, вторичной, латентной и третичной. Лечение зависит от стадии инфекции.

Очень важно диагностировать инфекцию как можно раньше. Это помогает в предотвращении повреждения основных органов тела.

Диагностировать его начальные симптомы всегда сложно, так как он проявляется только в форме небольшой безболезненной раны, называемой шанкром.

Кто в зоне риска

Любой человек с признаками или симптомами заболевания, должен быть проверен на сифилис. Некоторым пациентам следует пройти скрининг, даже если у них нет симптомов или они знают о сексуальном партнере, который инфицирован. Сексуально активные люди, могут обсудить свои факторы риска с врачом и спросить, какие необходимо сдать анализы на сифилис или другие ЗППП.

К числу наиболее подверженных риску относятся:

  • те, кто занимается незащищенным сексом;
  • пациенты с ВИЧ;
  • люди с многочисленными сексуальными партнерами.

Лица с положительным нетрепонемным тестом, к ним относится RW или всем известная реакция Вассермана, всегда должны проходить трепонемный анализ для подтверждения диагноза сифилиса. Эта цепочка процедур считается классическим алгоритмом тестирования.

Исследование РПГА может проводиться не только для выявления в организме возбудителя сифилиса. Чтобы диагностировать инфекцию сальмонеллы, врачи назначают Анализ с сальмонеллезным диагностикумом.

Образец отправляется в лабораторию, где бактерии, если они присутствуют, могут быть выращены. Выявление бактерий в образце подтверждает диагноз. Отрицательный результат говорит об отсутствии инфекции.

Количественное значение титра от 1:200 до 1:800 говорит об острой фазе инфекции.

Что обозначает рпга 1 320. Анализ крови рпга: расшифровка результатов

Измерение сывороточных антител пациента к дифтерийному токсину перед введением антитоксина поможет оценить вероятность диагноза дифтерии. Метод проведения РПГА с дифтерийным маркером позволяет диагностировать заболевание. Титр 1:80 подтверждает наличие дифтерии в организме.

Врач может назначит анализу РПГА на наличие вируса кори. Проведение исследование с коревым маркером показывает, есть ли в организме антитела для борьбы с вирусом. Если присутствует достаточное количество антител к кори, то говорят, что у человека есть признаки иммунитета к кори.

A: Разведение образца сыворотки:

  1. Добавляется 10 мкл сыворотки пациента в первую лунку А.
  2. Затем присоединяется 190 мкл разбавителя.
  3. Содержимое перемешивается с помощью микропипетки (разведенная сыворотка используется позже).

B: Тестирование образца сыворотки на наличие специфических антител:

  1. Добавляется 75 мкл контрольных клеток в лунку B и 75 мкл тестовых клеток в лунку C.
  2. Прибавляется 25 мкл разведенной сыворотки в каждую лунку B и C.
  3. Аккуратно встряхивается пластина, чтобы тщательно перемешать содержимое.
  4. Ячейки накрываются для защиты от прямых солнечных лучей, тепла и любых источников вибрации.
  5. Инкубируются 45-60 минут при комнатной температуре.
  6. Затем происходит интерпретация результатов.

Подготовка к исследованию:

  1. Анализ необходимо сдавать натощак (6-8 часов голода).
  2. За 30 минут до проведения теста лучше воздержаться от курения;
  3. За 24 часа до тестирования запрещается употреблять алкоголь.

Любой, кто обеспокоен тем, что может быть инфицирован или есть другая ИППП, должен поговорить с врачом и пройти исследование. Раннее лечение может вылечить заболевание. Многие люди могут не знать, что они инфицированы. Исследование крови это хорошая идея, чтобы обнаружить заболевание.

Что обозначает рпга 1 320. Анализ крови рпга: расшифровка результатов

Показания к РПГА:

  • после незащищенного секса;
  • когда имеется несколько половых партнеров;
  • если у сексуального партнера диагностировано заболевание;
  • при имеющихся симптомах сифилиса.

Факторы влияющие на результат анализа:

  • беременность;
  • внутривенное употребление наркотиков;
  • туберкулез;
  • хронические заболевания печени;
  • недавние прививки или воспаление слизистой оболочки сердца или клапанов.

Рекомендация!

При расшифровке крови на РПГА, убедитесь, что врач знает обо всех лекарствах, травах, витаминах и добавках, которые принимаете. Это включает препараты, не нуждающиеся в рецепте, и любые запрещенные наркотики.

Лабораторный скрининг можно объяснить следующим образом:

  1. 4 , если есть равномерный мат из клеток, охватывающих всю лунку.
  2. 3 , если большая часть лунки покрыта однородным матом клеток.
  3. Мат с меньшей плотностью, окруженный небольшим кольцом ( 2), является еще одним сценарием положительного анализа.
  4. Интенсивность мата уменьшается и окружена более плотным кольцом с отчетливо открытым центром.

Если имеется небольшой четкий центр и клетки располагаются на дне, результат можно считать как отрицательный РПГА. Показатели соответствующие нормальному диапазону, дальнейшее исследования не требуют. Но в случае промежуточного положительного теста назначаются исследование MHA-TP и FTA-ABS.

После постановки окончательного диагноза, обязательно пройти полное лечение. Необходимо пройти полный курс лечения антибиотиками, даже если симптомы проходят. Несоблюдение этого требования может вызвать рецидив.

Отрицательный тест – это нормально. Это означает, что в образце крови не было обнаружено антител к сифилису. Нормальные диапазоны значений могут незначительно отличаться в разных лабораториях. Некоторые медицинские центры используют разные измерения или тестируют разные образцы. Поговорите с лечащим врачом о значении результатов.

Этот тест может дать ложно-отрицательный результат при ранней и поздней стадии болезни. Анализ должен быть подтвержден другими скринингами, чтобы поставить окончательный диагноз.

Антитела, вырабатываемые в результате инфекции, могут оставаться в организме даже после того, как вирус был вылечен. В некоторых случаях организм может не продуцировать антитела, даже если человек заражен сифилисом. Это означает, что анализ будет неточным.

  1. ВИЧ.
  2. Болезнь Лайма.
  3. Малярия.
  4. Пневмония (только определенные виды).
  5. Системная красная волчанка.
  6. Внутривенное употребление наркотиков.
  7. Туберкулез.

Тест РПГА не идеален, но это надежный анализ, который может стать первым шагом, помогающим определить, заражены ли человек. При анализе крови сифилис может быть обнаружен уже через 1-2 недели после заражения. Наибольшую точность можно ожидать в течение трех месяцев, а не точные результаты возможны в любое время в течение первых 90 дней после заражения.

Люди, которые страдали от сифилисной инфекции в прошлом, также могут иметь ложно-положительный результат из-за задерживающихся в крови антител. Если РПГА тестирования возвращает отрицательный результат через 90 дней или позже после воздействия, это считается, что инфекция отсутствует.

Анализ крови на сифилис возможен в двух вариантах: нетрепонемные и трепонемные. Оба типа необходимы для подтверждения диагноза сифилиса.

Нетрепонемные тесты, просты, недороги и часто используются для скрининга. Однако они не являются специфичными для заболевания, могут давать ложно-положительные результаты и сами по себе недостаточны для диагностики. Лица с положительным нетрепонемным тестом всегда должны пройти трепонемный для подтверждения диагноза сифилиса.

Быстрые трепонемные анализы, выявляют антитела, специфичные для сифилиса. Трепонемные антитела появляются раньше, чем нетрепонемные, и обычно остаются обнаруживаемыми на всю жизнь, даже после успешного лечения.

Клинические анализы для подтверждения сифилиса:

  • Анализы крови: он обнаруживает текущую или прошлую инфекцию, поскольку антитела к болезни будут присутствовать в течение многих лет.
  • Жидкость тела: жидкость от шанкра во время первичной или вторичной стадии может быть оценена для болезни.
  • Спинномозговая жидкость: она может быть собрана через спинной мозг и проверена на предмет воздействия на нервную систему.

Пройти тестирование на РПГА – это способ узнать, есть ли заражение сифилисом. Это обязательная процедура для взрослого человека и забота о своем здоровье. Хорошая новость заключается в том, что сифилис полностью излечим с помощью антибиотиков – поэтому, чем раньше узнаете о его наличии, тем быстрее сможете от него избавиться.

Тесты очень чувствительны, но, поскольку они неспецифичны, ложноположительные результаты случаются. Это бывает при внутривенном употреблении наркотиков, беременности, болезни Лайма, некоторых типах пневмонии, малярии, туберкулезе и некоторых аутоиммунных заболеваниях, включая волчанку. Изучение особенностей иммунного ответа у больных сифилисом требует детального исследования антигенной структуры возбудителя и его влияния на систему органов хозяина.

Рпга анализ крови: что это за исследование, когда назначают, насколько точна расшифровка результатов, какие еще есть тесты на сифилис?

Это тесты определения антител IgG и IgM к стандартизированному кардиолипиновому антигену. Их существенным недостатком является сравнительно небольшая специфичность.

Низкая стоимость и простота выполнения позволяют отнести эти тесты к отборочным диагностическим, необходимым для установки предварительного диагноза и скрининга среди населения.

Именно нетрепонемные тесты сдаются при оформлении медицинской книжки, устройстве на работу, постановке на учет в женской консультации.

Недостатки:

  1. 1
    Минимальная чувствительность в стадии сифилиса первичного – 70%;
  2. 2
    Минимальная чувствительность в стадии сифилиса позднего – 30%;
  3. 3
    Возможность появления ложноотрицательных и ложноположительных результатов;
  4. 4
    Трудоёмкость выполнения РСК.

Преимущества:

  1. 1
    Относительно маленькая стоимость производства тестов;
  2. 2
    Получение быстрого ответа;
  3. 3
    Возможность их применения для скрининга.

Получение ложноположительных или слабоположительных проб возможно в следующих случаях:

  1. 1
    Нарушение технологии выполнения, при блокировании комплекса АГ-АТ.
  2. 2
    Наличие у больного аутоиммунных заболеваний (ревматоидный артирит, ревматизм, склеродермия, системная красная волчанка, саркоидоз и др.).
  3. 3
    Злокачественные новообразования.
  4. 4
    Вирусные и бактериальные инфекции.
  5. 5
    Эндокринные заболевания (аутоиммунный тиреоидит, сахарный диабет).
  6. 6
    Беременность.
  7. 7
    Употребление алкоголя.
  8. 8
    Приём жирной пищи.
  9. 9
    Старческий возраст.

Как видно из списка, существует достаточно причин для неверного результата. Поэтому к нему следует весьма настороженно относиться. Рассмотрим наряду с РСК ещё две пробы. Это реакция микропреципитации и VDLR (ее модификация).

Практически каждому из нас ежегодно приходится сдавать свою кровь для проведения различных исследований. Один из таких тестов – РПГА. Его требуют пройти при оформлении санитарной книжки, его назначает сдавать терапевт, кровь для этого анализа берут у беременных и даже детей. Что это за анализ такой, и что он показывает?

РПГА — это аббревиатура словосочетания «реакция пассивной гемагглютинации». Что же это значит? Это значит, что при помощи определенных реагентов, в которые добавляют кровь, специалисты проверяют эритроциты на способность к склеиванию, а потом по типу реакции делают выводы о наличии или отсутствии болезней.

Этот анализ крови проводится для обнаружения в организме антител к возбудителям заболеваний, например, к бледной трепонеме, которая известна как возбудитель сифилиса. Это означает, что при проведении такого исследования выявляют не сами бактерии Treponema pallidum, а только ту группу клеток, которую синтезирует организм для борьбы с болезнью.

В случае с сифилисом антитела могут обнаружиться в крови зараженного через четырнадцать и двадцать восемь дней после инфицирования, но иногда этот период увеличивается до сорока двух дней. Как это работает?

Когда в человеческий организм попадает чужеродная агрессивно настроенная бактерия, он определяет тип угрозы и начинает вырабатывать антитела для борьбы с возбудителем болезни.

Антитела разделяют на неспецифические и специфические или «нетрепонемные» и «трепонемные». Реакции, выявляющие тот или другой тип антител, называют аналогично.

РПГА относится к «трепонемным», или специфическим Treponema pallidum тестам.

Основное преимущество этого теста в его высокой специфичности, иначе говоря, узконаправленности на определенный тип антител.

Благодаря высокой чувствительности к «трепонемным» антителам, он позволяет удостовериться в правдивости положительного результата, другого, неспецифического теста. Такого, как антикардиолипиновый (RPR).

На сегодняшний день, для экспресс-теста на сифилис используют только специфические тесты, и РПГА в их числе.

Проверка крови на РПГА не занимает много времени. Обычно результаты бывают готовы через 2-3 дня с момента сбора крови. В случае острого недомогания, когда человек нуждается в оказании медицинской помощи, результаты теста выдают на месте в течение нескольких минут.

Реакция Вассермана- РВ, RW

, в среднем, становится положительной на 4-6 неделе заболевания. С увеличением поступления возбудителя сифилиса в кровь растет и титр RW. Своего максимума он достигает во вторичном рецидивном периоде сифилиса. При поздних формах заболевания реакция Вассермана нередко становится отрицательной.

Результат реакции Вассермана определяется наличием или отсутствием гемолиза. RW резко положительная — , полная задержка гемолиза, RW положительная – , значительная задержка гемолиза, слабоположительная rw – , – сомнительная RW- частичная и соответственно незначительная задержка гемолиза. Отрицательная RW — полный гемолиз.

Недостатком RW является ее неспецифичность, т.е. реакция Вассермана становится положительной при отсутствиии сифилиса. Такой анализ называется ложноположительный.

Реакция Вассермана может быть ложноположительной при различных заболеваниях и состояниях — болезни соединительной ткани ( системная красная волчанка, системная склеродермия, дерматомиозит), ревматоидный артрит, туберкулез, онкология, болезни крови, заболевания сердечно-сосудистой системы — инфаркт миокарда, сахарный диабет, заболевания почек, беременность , употребление лекарственных препаратов и т.д.

Из-за неспецифичности реакции Вассермана, ее ложных результатов также используются другие реакции.

Реакция микропреципитации (РМП)

и ее аналоги: RPR

тест — Rapid Plasma Reagins и тестVDRL(Venereal Diseases Research Laboratory) — это нетрепонемные тесты, которые широко применяются в качестве отборочных реакций на сифилис.

Анализ Крови РПГА — Какие Заболевания Выявляет и 6 Правил Подготовки

Для проведения РПГА берётся кровь из вены, полученный образец отправляют на исследование. Чтобы результаты были максимально точны и не искажены, важно правильно подготовиться к процедуре. Чтобы не пришлось сдавать кровь заново, необходимо руководствоваться следующими правилами перед визитом к специалисту:

  1. Кровь сдаётся ранним утром до 8-10 часов.
  2. Нельзя завтракать, пить чай или кофе, допустимо только употребление небольшого количества воды. Желательно, чтобы последний приём пищи был за 10-12 часов до анализа.
  3. Хотя бы за полчаса до обследования нельзя курить, но лучше всего сделать перерыв между сигаретами в 4-6 часов.
  4. В день анализа и минимум за сутки до него нельзя пить алкогольные напитки любой крепости.
  5. Если есть необходимость по графику принимать лекарства, об этом обязательно нужно сказать врачу, если нет возможности немного перенести это по времен.
  6. При плохом самочувствии или слабости нужно обязательно предупредить медсестру, которая забирает кровь для анализа, или врача.
  • К подготовке важно относиться ответственно, поскольку от результатов анализа зависит многое, в особенности точная постановка диагноза.
  • Ошибки в диагностике и назначение неверного лечения могут привести к плачевным последствиям.
  • Кровь забирается обычным способом из вены.

Многие пациенты неоднократно задавались вопросом: «Анализ крови РПГА – что это такое?» Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА) – такое исследование, которое помогает определить наличие в организме возбудителя, способного провоцировать сифилис.

Данный анализ предоставляет достоверные результаты и помогает начать своевременную терапию, которая назначается исключительно специалистом. Для получения качественных результатов рекомендуется соблюдать советы врача.

Расшифровкой анализа занимается специалист, поэтому не стоит заниматься самостоятельной диагностикой, так как это может привести к негативным последствиям. Рекомендовано обследование во многих ситуациях.

Далее медработник смешивает забранный материал с реактивом в стерильной пробирке. Смесь направляется на перемешивание, которое длится около часа.

В случае выпадения осадка эритроцитов результат определяется как положительный.

Реакция РПГА позволяет выявить не только сифилис, но и ряд других инфекционных заболеваний. Сдавать кровь понадобится, например, людям с подозрениями на острую кишечную инфекцию (сальмонеллез).

Болезнь провоцируют сальмонеллы, попадающие в организм человека. По мере развития сальмонеллеза постепенно разрушается структура ЖКТ, а также происходит сильная интоксикация. Основными симптомами кишечной инфекцией являются:

  • рвота;
  • диарея;
  • изменение запаха стула, а также появление в нём слизи или кровавых выделений;
  • боль в животе;
  • высокая температура;
  • озноб;
  • плохое самочувствие;
  • обезвоживание и пр.

Ещё одним заболеванием, для выявления которого можно применять РПГА, является корь. Она характеризуется поражениями слизистых глаза, ротовой полости и дыхательных путей. Кроме этого явными признаками болезни является сыпь на всём теле пациента, а также сильная интоксикация. Последняя сопровождается рвотой, нарушениями стула, нарушением водного баланса в организме и пр.

Исследование РПГА также может выявить столбняк, который является острой инфекцией.

Возбудитель этого заболевания легко проникает в организм через царапины, раны, порезы, ожоги и пр. Также можно заразиться столбняком, если в больницах или при косметических процедурах использовались нестерильные инструменты и материалы. Главными симптомами, по которым можно выявить столбняк, являются:

  • тонус мышц;
  • слабость;
  • раздражительность;
  • плохой аппетит;
  • апатия;
  • судороги в мышцах лица;
  • если столбняк следствие травмы, может ощущаться тянущая вокруг повреждённого участка тела;
  • затрудняется глотание воды и пищи.

Это исследование подразумевает особую реакцию, которая выявляет в организме неактивную гемагглютинацию, помогает вычислить наличие антигенов бледной трепонемы, считающейся контагием сифилиса – опасного заболевания, приводящего к неблагоприятным последствиям, сопровождающегося различной симптоматикой.

В организме она способна спровоцировать определенную реакцию иммунитета, то есть выработку специфических антител. Если после сдачи анализа в крови будут отмечаться положительные результаты, то это свидетельствует о прогрессировании данного организма. Означать это может только одно — срочная терапия.

Серологические исследования бывают:

  • специфические;
  • неспецифические.

Данное подразделение опирается на разновидности антител, которые можно выявить в крови пациента в результате обследования. В общей сложности, реакция пассивной гемагглютинации – РПГА – специфическое исследование в отношении бледной трепонемы.

Что обозначает рпга 1 320. Анализ крови рпга: расшифровка результатов

Иногда РПГА может повлечь за собой ложноположительный результат исследования у пациента. Данная ситуация наблюдается, если у человека развиваются и диагностируются аутоиммунные заболевания и патологии.

Получение ложных результатов теста могут быть спровоцированы из-за вирусных заболеваний, которые увеличивают в человеческом организме неспецифические антитела. Поэтому пациенту могут назначить иные виды исследований для выявления прогрессирующих патологий, а также повторные анализы РПГА.

Не следует думать, что такое исследование, как РПГА может проводиться только для выявления в организме возбудителя сифилиса.

Анализ с сальмонеллезным диагностикумом позволяет выявить наличие инфекции в пищеварительной системе – сальмонеллы. Начиная с четвертого дня после заражения, организм продуцирует антитела к антигенам сальмонеллы, выявить которые помогает метод РПГА.

Метод проведения РПГА с дифтерийным маркером позволяет диагностировать дифтерию и оценить иммунитет после проведения вакцинации. Антитела начинают вырабатываться иммунной системой уже на следующий после заражения день, и остаются в организме на протяжении нескольких недель.

Дизентерийный маркер при РПГА наиболее точно выявляет шигеллез (бактериальную дизентерию), даже по сравнению методом лабораторной диагностики посредством бактериального посева. Если больной не получает качественного лечения, то болезнь перетекает в хронический процесс, при котором часто случаются рецидивы.

Анализ позволяет диагностировать острую и хроническую фазу диареи, выявить возбудителя дизентерии, отличить бактериальный шигеллез от колоректального рака, эндокринных нарушений или воспаления толстой кишки.

Проведение исследование с коревым маркером позволяет определить заболевание корью. Такое обследование может стать альтернативой часто проводимому для диагностики кори анализу РТГА.

Итак, РПГА анализ крови – что же это? Подводя итоги, можно смело утверждать, что это современный, высокочувствительный и достоверный метод диагностики различных заболеваний бактериологической этиологии.

Анализ крови на РПГА – это простое исследование, образец биоматериала берется путем введения иглы в вену на руке. Позже он отправляется в лабораторию для дальнейшего анализа. Чтобы результаты скрининга были достоверными, следует придерживаться необходимых рекомендаций. Чаще всего результаты анализа доступны в течение суток, иногда может потребоваться от 2 до 4 дней.

Примечание! Когда доктор подозревает, что сифилисная инфекция перешла на мозг, доктор может решить дополнительно проверить спинномозговую жидкость в дополнение к крови.

РПГА является одним из самых значимых анализов крови. Он позволяет выявить сифилис на любых стадиях, а также ряд других заболеваний. Этот анализ считается одним из самых точных методов выявления возбудителей сифилиса. В каких случаях пациента могут отправить на обследование и что значат результаты?

Что такое РПГА

Что обозначает рпга 1 320. Анализ крови рпга: расшифровка результатов

РПГА является реакцией пассивной гемагглютинации, а если точнее — анализом для выявления этого процесса.

В ходе исследования легко можно обнаружить антигены бледной трепонемы, именно этот микроорганизм провоцирует сифилис.

Если человек полностью здоров, бледная трепонема, попав в организм, провоцирует ответную реакцию со стороны иммунной системы — выработку особых антител. По их наличию и определяется, есть заболевание или нет.

Всё зависит от того, какие именно антитела присутствуют в крови. РПГА относят к специфическому типу анализа для выявления возбудителей сифилиса.

Впервые такие исследования стали проводить в 1965 году, РПГА оказался настолько точным анализом, что быстро стал наиболее популярным среди остальных методик диагностики сифилиса.

Исследование позволяет выявить болезнь на любой стадии, включая латентную.

Однако в некоторых случаях РПГА может дать ложную положительную реакцию. Это может случиться из-за наличия некоторых вирусных заболеваний или при сниженном иммунитете после какой-либо болезни.

Если человек заразился сифилисом, выявить болезнь можно не ранее чем через 2-4 недели — только на этом сроке начинают вырабатываться антитела к возбудителю. Иногда инкубационный период может длиться более месяца.

РПГА, анализ крови, при ранней диагностике имеет точность 86%. Начальная стадия заболевания самая «неуловимая» для этого типа исследования.

Что обозначает рпга 1 320. Анализ крови рпга: расшифровка результатов

А вот на следующих стадиях сифилиса и у носителей латентного вируса, точность диагностики повышается до 99-100%.

Это позволяет применять РПГА как дополнительное исследование для подтверждения уже имеющегося диагноза или при положительных результатах других анализов (нетрепонемного типа). РПГА всё чаще используют для скрининга, но при положительных результатах так или иначе проводят ещё одно специфическое исследование.

  Анализ крови АТ ТПО и расшифровка результатов

Кто в зоне риска

Для проведения РПГА требуется направление от врача. Направить пациента на анализ могут в нескольких случаях:

  1. Если имеются видимые признаки болезни. Сюда относятся язвы на коже, увеличенные лимфоузлы, частичное облысение волосяного покрова и пр.
  2. Если у пациента был прямой контакт с больными сифилисом, для профилактики ему также необходимо пройти обследование.
  3. Все доноры, сдающие кровь, обязаны проверяться на сифилис перед процедурой.
  4. Для оформления санитарной книжки или ежегодных профосмотров на предприятиях также потребуется пройти необходимые обследования.
  5. Если скрининг дал положительный результат.
  6. На сифилис проверяют каждого, кого готовят к госпитализации в стационар.
  7. Обследование пациента перед любой операцией также требует прохождения обследования.
  • у пациента проявляются клинические симптомы сифилиса (появление эрозий, язв, увеличение лимфоузлов) и регионарной лимфаденопатии; в этом случае РПГА на сифилис является незаменимым тестом, поскольку позволяет выявить болезнь на первичной, вторичной и третичной стадии;
  • возникновение признаков очаговой или диффузной алопеции;
  • если человек имел половой контакт с носителем сифилиса;
  • человек хочет стать донором, сдавать кровь и плазму;
  • РПГА входит в ежегодное профилактическое обследование, которое назначается работникам разных госучреждений;
  • при оформлении медицинской книжки;
  • при госпитализации.
  • сдавать биологический материал разрешено только на пустой желудок;
  • перед мероприятием (если сдача крови осуществляется днем или вечером) разрешено пить только минеральную воду без газов, употреблять жидкость нужно в небольших объемах;
  • за пару часов до сдачи биоматериала запрещено курить;
  • категорически запрещено употреблять спиртные напитки за двое суток до процедуры;
  • если пациент принимает какие-либо лечебные препараты, об этом непременно нужно предупредить лечащего врача;
  • если человек чувствует себя плохо, забор крови лучше перенести на другой день, поскольку это может негативно сказаться на расшифровке результата.

Исследование РПГА для диагностики других инфекций и патологий

Что такое РПГА

Анализ крови РПГА относится к классическим способам диагностики, которые применяются уже многие десятки лет, но по-прежнему актуальны. Для чего в настоящее время проводится РПГА? Почему его иногда предпочитают современным методикам, и когда может столкнуться обычный человек с необходимостью такого исследования?

Наиболее современным методом современной лабораторной диагностики инфекционных заболеваний является полимеразная цепная реакция (ПЦР), которая позволяет определить в любом биологическом материале, от крови и до соскоба со слизистых оболочек остатки генома, или уникального наследственного кода возбудителя болезни.

Этот способ исследования (реакция пассивной гемагглютинации, РПГА) имеет и второе название: реакция непрямой гемагглютинации (РНГА). И в практике может встретиться как аббревиатура РПГА, так и РНГА.

Что это за анализ? Для него необходима центрифугированная сыворотка крови пациента, которую совмещают с особым диагностическим реагентом. Классически он называется «эритроцитарный антигенный диагностикум». Для его приготовления долгие годы использовались клетки красной крови, или эритроциты.

Но так было сравнительно давно, а в настоящее время биологический материал уже не используют, и вместо этого применяют микроскопические частицы латекса.

На эти частицы с помощью особой технологии наносят характерные для данного инфекционного возбудителя антигены, которые являются его «визитной карточкой». В результате получается множество частиц, на поверхности которых находятся адсорбированные, и крепко связанные с носителем активные молекулы антигена.

В том случае, если в сыворотке крови пациента находятся выработанные к данному возбудителю антитела, то эти частицы латекса или эритроциты, склеиваются антителами между собой, и выпадают в осадок, который называется агглютинацией (переводе означает «склеивание»).

Эту реакцию ставят в специальных планшетах, которые выполнены из пластика и рассчитаны на небольшие объемы. А раньше анализ крови на РПГА проводилась с набором обычных пробирок. В них в разных разведениях находилась кровь пациента, к которой и добавляли диагностикум.

В некоторых случаях применяется зеркальный метод, когда диагностикум содержит не антигены, а антитела. Этот метод (РОНГА, или обратная гемагглютинация) применяется при поиске инфекции, при которых в крови циркулируют токсины, например при ботулизме.

В таком случае, если у пациента в крови есть ботулотоксин, то он связывается со специфическими антитоксическими антителами диагностикумов, и также наблюдается реакция агглютинации, которую можно определить в зависимости от разведения сыворотки крови.

Расшифровка складывается из самого факта агглютинации, и того максимального разведения сыворотки крови, при которой она еще уверенно определяется.

Наиболее часто используется разведения от 1:20 до 1:160 и выше. В настоящее время непрямую РНГА чаще всего используют для первичной диагностики сифилиса.

Рпга при сифилисе

Анализ крови РПГА — что это при сифилисе? Это проведение реакции в ее классическом виде, при которой у пациента в сыворотки его крови выявляются циркулирующие антитела к возбудителю сифилиса.

Этот способ является недорогим, быстрым, и позволяет первично использовать исследовать биологический материал для скрининга этой инфекции, для обследования доноров, сдающих кровь, для контактных лиц, близко общавшихся с больными.

Таким образом, Рпга при сифилисе является методом первичной неспецифической лабораторной диагностики. Но это вовсе не значит, что если такие антитела выявлены, то это анализ может считаться недостоверным.

Выявление антител к бледной спирохете является основой лабораторной диагностики сифилиса и его подтверждения.

И реакция пассивной гемагглютинации относятся к специфическим или трепонемный тестам, поскольку в нем используются «настоящие», сифилитические антигены.

После того, как к специфическому диагностикуму добавляется сыворотка крови, больного сифилисом, то происходит гемагглютинация. Эти циркулирующие в крови антитела могут появиться уже через 2 недели после заражения.

В этом случае речь идет об антителах «быстрого реагирования», или об иммуноглобулинах класса М. Через месяц они дополняются специфическими иммуноглобулинами класса G.

Именно поэтому чувствительность этой реакции при дебюте заболевания несколько ниже, а если человек болен сифилисом несколько лет, то ее чувствительность приближается к 100% против 86% в случае первичного, свежего и недавнего сифилиса.

Что обозначает рпга 1 320. Анализ крови рпга: расшифровка результатов

Эта реакция является высокоспецифичной и с ее помощью можно подтвердить или опровергнуть первичный диагноз, который был поставлен с помощью применения нетрепонемного теста. К таким нетрепонемным тестам относится RW или всем известная реакция Вассермана.

При ее постановке в качестве антигена берется кардиолипиновый антиген, который не имеет никакого отношения к возбудителю.

Он очень похож по своей структуре на сифилитический, но, все-таки, несколько отличается от него, и поэтому при этом виде исследования возможны ложноположительные реакции.

Поэтому в том случае, если у пациента при реакции Вассермана выявлено положительное ее значение, то для подтверждения или опровержения результатов RW необходимо выполнить реакцию пассивной гемагглютинации. Специфичность РПГА составляет от 96 до 100%. Даже при скрытом сифилисе без всяких проявлений она может также поставить диагноз с практически 100% вероятностью.

Поскольку правила диагностики сифилиса обязательно требуют переподтверждения первичного диагноза другим методом, то в том случае, если первичным методом диагностики является сама РПГА, то ее тоже необходимо переподтвердить, несмотря на ее высокую чувствительность, но уже только с помощью другого метода.

Поскольку антитела, принадлежащие к классу иммуноглобулинов G, сохраняются в сыворотке крови, как правило, пожизненно, то даже после активного и успешного лечения сифилиса с последующим выздоровлением эти антитела остаются положительными. Только в том случае, когда сифилис заподозрили и пролечили в «самом зародыше», через несколько дней после заражения, на стадии формирования твердого шанкра и регионарного лимфаденита, то тогда РПГА может быть отрицательной.

Тот факт, что и при вторичном сифилисе, и при третичном РПГА будет одинаково положительной, то это значит, что такое исследование нельзя использовать для дифференциальной диагностики стадий заболевания.

Как расшифровывается РПГА анализ крови, назначение и подготовка к анализу

Особенно высокие показатели, то и значительное разведение сыворотки крови пациента при проведении РПГА возникают при вторичном сифилисе, а также при ранней и скрытой форме этой болезни.

Чаще всего положительный результат теста свидетельствует о наличии сифилиса (в 70% случаев) — как врожденного, так и приобретенного, а также может говорить о таких патологиях:

  • ВИЧ-инфекция;
  • разные формы гепатита;
  • недавно перенесенный инфаркт миокарда;
  • возвратный тиф;
  • туберкулез;
  • наличие венерических заболеваний;
  • клещевой боррелиоз;
  • дифтерия;
  • диффузные заболевания соединительной ткани;
  • злоупотребление наркотическими веществами (вводимыми путем инъекций);
  • наличие воспалительного процесса в ротовой полости или в районе гениталий;
  • формирование новообразований злокачественной природы;
  • инфекционный мононуклеоз.

Чтобы получить достоверные сведения, сдавать кровь нужно с учетом всех врачебных рекомендаций, в противном случае возбудитель сифилиса может быть не выявлен.

Часто пациенты задаются вопросом, почему при подозрении на сифилис назначают именно РПГА. Специалисты уверяют, что тестирование является столь популярным, поскольку в 99% случаев дает правильный результат.

Реакция агглютинации не произойдет, только если в организме отсутствуют антитела трепонемы, в противном случае обследование обязательно покажет их присутствие.

Медицинская практика показывает, что чувствительность теста очень высока, причем положительная реакция будет выявлена даже при скрытых стадиях заболевания. Благодаря высокой результативности тест не теряет актуальности даже в настоящее время.

Сдачу биоматериала на данное исследование часто назначают при подозрении на коклюш, на брюшной тиф, на иерсиниоз (острое инфекционное заболевание ЖКТ). Такая востребованность обусловлена тем, что по чувствительности и результативности РПГА превосходит практически все серологические анализы.

Тест помогает определить большую часть недугов, вызванных патогенными клетками и риккетсиями. При этом в роли антигенов можно использовать ингредиенты бактериальных вакцин, бактериальные экстракты (с коревым или коклюшным диагностикумом), очищенные антигены всевозможных микроорганизмов.

Диагностика сифилиса имеет некоторые особенности и отличается от диагностики других бактериальных инфекций. Сложное строение и антигенные свойства бледной трепонемы обусловливают ошибки в интерпретации результатов серологических реакций.

Сдать анализ крови на сифилис предлагают 3 основным группам пациентов:

  1. 1
    Скрининг и диспансеризация групп населения (в том числе и беременность, постановка на учет в женской консультации, поступление на работу и оформление медкнижки и так далее).
  2. 2
    Скрининг в группах риска (незащищенные половые контакты с человеком, инфицированным сифилисом, лица после принудительных сексуальных контактов, ВИЧ-инфицированные и так далее).
  3. 3
    Лица, имеющие симптомы заболевания, или лица с подозрением на сифилитическую инфекцию.

Где сдать анализ

Услуги по осуществлению анализов с помощью РПГА-тестов предлагают разные диагностические центры.В лабораторной службе Хеликс результаты можно получить через 2 дня после сдачи биологического материала. Инвитро предлагает свои услуги по исследованию крови на сифилис методом РПГА. Срок исполнения в этом центре — 1 рабочий день.

Как расшифровывается РПГА анализ крови, назначение и подготовка к анализу

Метод РПГА является высокоточным и позволяет определить наличие трепонемной инфекции на любом этапе венерического заболевания. Анализы назначаются для подтверждения заражения пациента, ранее обследованного с помощью неспецифических тестов.

При получении сомнительного анализа врачи рекомендуют пройти повторное исследование через 2 недели.

Вы наверное понимаете, насколько серьезный диагноз может быть поставлен по результатам РПГА анализа.

Чтобы не допустить искажение результатов теста достаточно следовать нижеперечисленным рекомендациям:

  • Никакой пищи накануне сдачи крови на РПГА употреблять нельзя. Этот анализ, как и большинство других, производится строго натощак;
  • Любые напитки, кроме простой чистой воды также не должны попасть в организм в день, отведенный под анализ. Если будете пить разрешенную жидкость, то ее объем должен быть минимальным, чтобы он никак не повлиял на состав крови;
  • Обычно, чтобы человек не морился голодом и жаждой, забор крови происходит в утренние часы;
  • В это же утро лучше вовсе не курить. Вещества, содержащиеся в дыму и парах, могут дать негативную реакцию, из-за чего результаты будут неверно расшифрованы лаборантом;
  • Запрет возлагается также и на алкоголь. Причем пить спиртное лучше прекратить еще за несколько дней до исследования.

Придя в специальный кабинет, пациент должен оголить свою руку от одежды, чтобы медсестра смогла взять кровь из вены. Процедура эта известна практически всем. Она относительно безболезненна и быстра. По ее окончанию Вам скажут, когда результаты анализа РПГА будут готовы, чтобы их можно было забрать.

Исследование РПГА для диагностики других инфекций и патологий

Как расшифровывается РПГА анализ крови, назначение и подготовка к анализу

Исследование РПГА также применяется для выявления коклюша на любой стадии. Это очень важно, поскольку на начальной стадии заболевания нет чётких симптомов, позволяющих его диагностировать. Подозрения на инфекцию чаще всего появляются уже на более поздних стадиях.

При коклюше может быть повышенная температура, однако точно так же она может оставаться в пределах нормы и не превышать стандартные 36,6. Позже у больного появляется кашель, приступы которого постепенно становятся всё чаще и сильнее.

Итак, реакция пассивной гемагглютинации является крайне эффективным методом диагностики сифилиса. Несмотря на то, что чаще всего РПГА используют для выявления антител бледной трепонемы, с помощью этого анализа можно установить наличие и других инфекций – кори, коклюша, сальмонеллеза и пр. Чтобы результаты исследования были максимально чёткими, важно правильно к ним готовиться и соблюдать все необходимые условия.

РПГА анализ – методика, являющаяся одной из наиболее важных среди прочих исследований крови. С помощью неё можно определить развитие неприятных болезней кишечно-инфекционного характера. Но зачастую анализ используется для выявления сифилиса. Исследование имеет высокую точность, достоверность.

РПГА расшифровывается, как реакция пассивной гемагглютинации.

Предостережение! Явление прозоны и биологическая ложно-положительная реакция являются двумя недостатками этого теста.

Почему для диагностики сифилиса назначается именно РПГА

Данная методика активно используется по всему миру не только потому, что она является очень результативной, но и из-за определенных преимуществ:

  • проведение теста не представляет сложности, от пациента требуется лишь сдать кровь;
  • для проведения исследования не нужно специальное оборудование;
  • исследование не занимает много времени, обычно пациенту оглашают результат в течение 24 часов;
  • тест имеет высокую чувствительность и специфичность к сифилису.
  1. 1
    Идентификация Treponema pallidum в тёмном поле (темнопольная микроскопия).
  2. 2
    Заражение подопытных животных (культивирование в лабораторных животных).
  3. 3
    ПЦР (полимеразно-цепная реакция).
  4. 4
    ДНК-зонд или гибридизация нуклеиновых кислот.

Серологические реакции – это методы лабораторной диагностики, базирующиеся на обнаружении антител (сокращенно АТ) к антигенам бледной трепонемы (сокращенно АГ). Они имеют основное значение для подтверждения диагноза.

  1. 1
    Нетрепонемные тесты:
    • Реакция Вассермана (РСК);
    • Реакция микропреципитации (МР, РМП) и ее аналоги, которые приведены ниже;
    • Тест быстрых плазменных реагинов (RPR, РПР);
    • Тест с красным толуидином и сывороткой (TRUST);
    • Нетрепонемный тест Лаборатории исследования венерических болезней – VDRL.
  2. 2
    Трепонемные тесты:
    • Р-ция иммобилизации Treponema pallidum – РИБТ/РИТ;
    • Р-ция иммунофлюоресценции – РИФ, FTA (разведения сывороток РИФ-10, РИФ-200, РИФ-абс);
    • Р-ция пассивной гемагглютинации (РПГА, ТРПГА, TPHA);
    • Иммуноферментный анализ (ИФА, EIA);
    • Иммуноблоттинг.

Рисунок 1 – Алгоритм серодиагностики сифилиса

Эти методы сводятся к выявлению особенностей гистоморфологии сифилитических проявлений. Внимание уделяется тонкостям строения твёрдого шанкра. Однако, дифференциальная диагностика инфекции с помощью гистологии весьма затруднительна. Гистоморфология используется с другими лабораторными и клиническими тестами.

ПЦР, разработанная в 1991 году для обнаружения молекулы дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК) бледной трепонемы, является высокочувствительным и специфичным, позволяет выявить фрагменты ДНК возбудителя.

Как расшифровывается РПГА анализ крови, назначение и подготовка к анализу

Базируется данный анализ на копировании коротких участков ДНК бледной спирохеты, который удовлетворяет заданным параметрам и присутствует в образце. Всё это выполняется в искусственных условиях (in vitro). Реакция проводится в приборе – амплификаторе, который обеспечивает периодизацию температурных циклов. Происходит охлаждение с последующим нагреванием пробирок с погрешностью в 0,1˚С.

ДНК-матрицу прогревают в течение 2 минут при температуре 92-98˚С (максимальная температура используется, если полимераза термостабильна). При нагревании цепи ДНК расходятся из-за распада водородных связей между ними. В стадии отжига температуру реакции снижают для связывания праймера с одноцепочечной матрицей.

Отжиг занимает около 30 секунд, в течение этого времени синтезируются сотни нуклеотидов. Вновь синтезируемые молекулы копируются полимеразой, в результате многократно увеличиваются специфические фрагменты дезоксирибонуклеиновой кислоты. Последующая детекция фрагментов проводится с помощью электрофореза в геле агар.

Высокая чувствительность кроликов к Treponema pallidum (порядка 99,9%) позволяет применять их в диагностике сифилитической инфекции.

Вернёмся к трепонемным и нетрепонемным тестам, так как они используются чаще всего. Рассмотрим их преимущества и недостатки, а также ошибки в интерпретации результатов.

Это проба, основанная на способности комплемента связываться с комплексами АГ-АТ. Идентифицируют образовавшийся комплекс с помощью гемолитической системы. Кардиолипиновый антиген заметно повышает чувствительность пробы.

Чувствительной является и реакция Колмера, которая заключается в выполнении при различных температурных режимах. Так, первая фаза реакции Колмера протекает при температуре 20˚С в течение получаса, вторая фаза при тепературе 4-8˚С на протяжении 20-ти часов. За это время происходит связывание комплемента.

При выполнении РСК возможно получение резко положительных результатов. Причиной, вероятно, является большой титр антител в неразведенной сыворотке. В этом случае пробы ставят с уменьшающими дозами.

Для дифференцировки стадий сифилиса и оценки эффективности противосифилитического лечения определяют количество АТ в сыворотке.

Позитивность пробы оценивают с помощью крестов, также в реакциях Вассермана, Колмера и Канна указывается разведение сыворотки.

Так как трудоёмкость выполнения вышеуказанных проб велика, то для широты обхвата диспансеризацией разных групп населения разработан ускоренный способ серодиагностики сифилиса, так называемый экспресс-метод – реакция микропреципитации (сокращенно МР, РМП).

Она выполняется с кардиолипиновым антигеном и вспомогательными веществами. Его преимуществом является забор периферической крови для исследования. Это значительно ускоряет и саму методику, и работу лаборантов.

Рисунок 2 – Реакция микропреципитации (схема)

Для проведения МР необходимы плазма или инактивированная сыворотка крови пациента (именно они содержат антитела). Далее плазму помещают в маркированные лунки. Затем, к исследуемому материалу добавляют каплю кардиолипинового антигена, смешивают и встряхивают. В итоге в сыворотке инфицированного появляются характерные хлопья, разные по степени интенсивности.

Это качественная проба. При количественной оценке используются 10 разведений сыворотки, помещаемой в 10 лунок с соответствующей маркировкой. При качественной МР ответ указывается в виде крестов (плюсов) или минуса, при количественной указывается титр антител (1:2, 1:4 и так далее).

Наличие хлопьев расценивается как положительный или слабоположительный ответ. Возможно появление флокулята и при отсутствии заболевания, поэтому окончательную оценку полученного результата проводят после контрольного исследования или проведения других реакций (РИБТ, РИФ, ИФА, РПГА).

Таблица 1 – Расшифровка результатов серологических реакций (анализов крови на сифилис). Для просмотра кликните по таблице

Оценка реактивности тестов выполняется также «крестами»:

  1. 1
    Максимальный ответ (резко положительная проба) обозначается с помощью 4-х крестов.
  2. 2
    Положительная проба обозначается с помощью 3-х крестов.
  3. 3
    Слабоположительную реакцию обозначают двумя крестами.
  4. 4
    Один крест свидетельствует о сомнительном и отрицательном результате.
  5. 5
    Отрицательный ответ маркируют знаком «минус».

Проблема оптимизации лабораторной диагностики сифилиса не потеряла свою актуальность до настоящего времени. Современные методы диагностики, несмотря на стремление учёных привести диагностику к максимально высоким показателям чувствительности и специфичности, требуют контрольной проверки и индивидуального подхода.

Особенностью сифилитической инфекции является феномен серорезистентности, который так и не получил научного объяснения. Диагноз выставляется после полноценного обследования больного эпидемиологическими, клиническими, лабораторными методами.

На фоне экономико-технического развития медицины наблюдается и прогресс в разработке новых критериев диагностики сифилиса. Всё это позволит быстро, успешно и безошибочно лечить пациентов.

Особенности

  • Стоимость:
    .
  • Срок исполнения:
    4 рабочих дней.
  • Где можно сдать:
    В медицинском взятие биоматериала не производится. Необходимо по предварительному звонку заказать в стерильную пробирку и ознакомиться с правилами забора биоматериала в справочно-информационной службе по тел. (8342) 322-889
  • Подготовка к анализу:
    Венозная кровь сдается утром натощак из вены.

Описание

Общая характеристика.

Как расшифровывается РПГА анализ крови, назначение и подготовка к анализу

Реакция гемагглютинации.

В основе реакции прямой гемагглютинации лежит способность эритроцитов склеиваться при адсорбции на них определенных антигенов. Поскольку это происходит без участия иммунной сыворотки, реакция не является серологической. В серологических исследованиях реакцию прямой гемагглютинации применяют для выбора рабочего разведения антигена, используемого в реакции торможения гемагглютинации. В основе последней лежит задержка гемагглютинирующего действия антигена специфической сывороткой.

Реакция непрямой гемагглютинации (пассивная гемагглютинация) наступает в том случае, когда к эритроцитам, сенсибилизированным антигеном, т.е. несущим на себе адсорбированный антиген, добавляют иммунную сыворотку, соответствующую антигену. Эта реакция часто превосходит по чувствительности и специфичности другие серологические методы, ее применяю при инфекциях, вызванных бактериями и риккетсиями.

Реакцию непрямой гемагглютинации (РНГА или РПГА) с танизированными эритроцитами проводят в двух вариантах: с известным антигеном для обнаружения антител (по Бойдену) и с известными антителами (сывороткой) для выявления антигена (по Рыцаю). Антигенами в реакции непрямой гемагглютинации могут служить очищенные антигены соответствующих микробов, экстракты бактериальных взвесей, надосадочные жидкости формалиновых, спиртовых, гретых бактериальных вакцин.

Бактериальные инфекции, сальмонеллез, сыпной тиф, паратифы А и В, дифтерия, менингококковая инфекция и др.;

Идентификация выделенных микробов.

венозная кровь.

серологический.

Результат

Указывается наличие или отсутствие патогенных микроорганизмов и их видовая принадлежность. При получении их роста определяется чувствительность к антибиотикам.

в норме не обнаружено.

В норме результат отрицательный.

Отсутствие роста в посеве может косвенно свидетельствовать в пользу кишечной инфекции, вызванной патогенными микробами (особенно на фоне начатого лечения). В острый период заболевания резко нарушается видовой состав микрофлоры кишечника, и нормальные представители вытесняются патогенными. При низком титре последних может наблюдаться отсутствие роста какой-либо флоры. В этом случае рекомендуется повторное исследование.

Прямые тесты обнаруживают микроорганизм или его ДНК, а непрямые лишь косвенные признаки наличия паразита в крови.

Кто в зоне риска

  • дифтерии;
  • дизентерии;
  • сальмонеллеза.

На заметку! Когда у беременной женщины диагностирован сифилис, инфекция может быть передана ее будущему ребенку. Все беременные женщины должны быть проверены при первом дородовом посещении.

РПГА при сифилисе является методом первичной неспецифической лабораторной диагностики. Это самый часто используемый анализ во всем мире для скрининга. Исследование применяется из-за его простоты, чувствительности и доступности. РПГА имеет количественные данные о титре антител. Эта оценка обладает необходимым значением в будущем лечении.

Как проводится исследование

Точно сказать, как долго делается расшифровка результатов, невозможно. Скорость ее зависит от самого типа исследования, а также от применяемого оборудования.

Чаще всего РПГА расшифровывается в течение суток, но в некоторых случаях процедура может занять от 2 до 4 дней. Если лаборатория будет сильно загружена, пациенту выдадут бланк с результатами не раньше чем через 5 суток.

Кровь из вены на РПГА

К подготовке важно относиться ответственно, поскольку от результатов анализа зависит многое, в особенности точная постановка диагноза.

Ошибки в диагностике и назначение неверного лечения могут привести к плачевным последствиям.

Возможно, Вам дали направление в лабораторию на анализ РПГА, но Вы не очень понимаете, что означает эта аббревиатура. Что это такое и насколько все серьезно Вы подробно узнаете из данной статьи.

Помимо пациентов с выраженными симптомами венерических заболеваний, направление на РПГА анализ могут дать людям, проходящим медицинское обследование с целью устройства на работу, перед проведением хирургической операции, или при становлении женщины на учет по беременности. Здесь нет ничего страшного и зазорного, просто, таким образом, специалисты анализируют население на предмет серьезных половых заболеваний, что позволяет своевременно выявить носителей инфекции и оказать им должную медицинскую помощь еще до развития осложнений.

Если Вы практикуете незащищенный секс (независимо от того, как хорошо Вы знакомы с сексуальным партнером, ведь многие люди сами не подозревают о своем заражении), либо подозреваете своего постоянного партнера, Вы можете спокойно сдать кровь и в скором времени узнать результат и развеять страх от неизвестности.

Насколько анализ достоверен?

Если человек заразился сифилисом, выявить болезнь можно не ранее чем через 2-4 недели – только на этом сроке начинают вырабатываться антитела к возбудителю. Иногда инкубационный период может длиться более месяца. РПГА, анализ крови, при ранней диагностике имеет точность 86%. Начальная стадия заболевания самая «неуловимая» для этого типа исследования. А вот на следующих стадиях сифилиса и у носителей латентного вируса, точность диагностики повышается до 99-100%.

Если человек заразился сифилисом, выявить болезнь можно не ранее чем через 2-4 недели — только на этом сроке начинают вырабатываться антитела к возбудителю. Иногда инкубационный период может длиться более месяца. РПГА, анализ крови, при ранней диагностике имеет точность 86%. Начальная стадия заболевания самая «неуловимая» для этого типа исследования. А вот на следующих стадиях сифилиса и у носителей латентного вируса, точность диагностики повышается до 99-100%.

Расшифровка результатов

Чтобы выявить наличие патологии, к полученной крови нужно добавить специальную сыворотку. Если в организме человека присутствуют трепонемы, произойдет реакция агглютинации, вследствие чего эритроциты выпадут в осадок.

Число склеенных эритроцитов во многом зависит от того, какое количество антител присутствует в реагенте. Пассивная гемагглютинация показывает не только присутствие антител, но также дает медику возможность определить их количество.

Многочисленные клинические исследования подтвердили, что такое эта методика дает гарантированно правильный результат, если анализ проводился при соблюдении всех правил и пациент строго придерживался врачебных рекомендаций перед забором крови.

Если тестирование дало положительный ответ, вероятность того, что человек инфицирован сифилисом, составляет более 95%
.

Неправильная реакция может проявиться только в тех случаях, если с момента инфицирования прошло слишком мало времени либо лаборант не соблюдал инструкцию при исследовании.

Как расшифровывается РПГА анализ крови, назначение и подготовка к анализу

Что касается ложноположительного результата, то он может быть, если диагностика проводилась при наличии инфекционных заболеваний или патологических состояний.

Ложный результат отличается от истинного положительного тем, что он очень быстро становится отрицательным, если тестирование провести повторно через 2 недели.

На данный момент анализ РПГА до сих пор остается самым эффективным и достоверным тестом определения сифилиса и прочих опасных патологий. Поэтому при подозрении на наличие многих заболеваний первым делом медики направляют пациента на РПГА.

Сифилис – заболевание инфекционной природы, обусловленное спирохетой Treponema pallidum, склонное к прогредиентному хроническому течению, с чёткой периодизацией клинической симптоматики.

Преобладание полового пути передачи над контактным и трансплацентарным ставит это заболевание в ряд венерических (ЗППП, ИППП). Помимо указанных способов передачи инфекции особую роль играет артифициальный путь (от лат. «artificio» – искусственно созданный).

Он характерен для медицинских учреждений, в основном, реализуется в условиях стационара. Инфицирование происходит при гемотрансфузиях, различных хирургических операциях, инвазивных диагностических методах.

Несмотря на карантинизацию донорской крови, проблема выявления сифилиса у доноров на разных стадиях заболевания все ещё актуальна.

Поэтому диагностические мероприятия при сифилисе требуют стандартизации, внедрения новых чувствительных и информативных методов идентификации, а также сведения к минимуму ошибок и неправильной трактовки результатов анализов.

    Показать всё

    1.
    Классификация методов лабораторной диагностики

    Диагностика сифилиса имеет некоторые особенности и отличается от диагностики других бактериальных инфекций. Сложное строение и антигенные свойства бледной трепонемы обусловливают ошибки в интерпретации результатов серологических реакций.

    Сдать анализ крови на сифилис предлагают 3 основным группам пациентов:

    1. 1
      Скрининг и диспансеризация групп населения (в том числе и беременность, постановка на учет в женской консультации, поступление на работу и оформление медкнижки и так далее).
    2. 2
      Скрининг в группах риска (незащищенные половые контакты с человеком, инфицированным сифилисом, лица после принудительных сексуальных контактов, ВИЧ-инфицированные и так далее).
    3. 3
      Лица, имеющие симптомы заболевания, или лица с подозрением на сифилитическую инфекцию.

    Все лабораторные методы условно подразделяют на прямые и непрямые.

    1.1.
    Прямые методы

    1. 1
      Идентификация Treponema pallidum в тёмном поле (темнопольная микроскопия).
    2. 2
      Заражение подопытных животных (культивирование в лабораторных животных).
    3. 3
      ПЦР (полимеразно-цепная реакция).
    4. 4
      ДНК-зонд или гибридизация нуклеиновых кислот.

    1.2.
    Непрямые методы

    Серологические реакции – это методы лабораторной диагностики, базирующиеся на обнаружении антител (сокращенно АТ) к антигенам бледной трепонемы (сокращенно АГ). Они имеют основное значение для подтверждения диагноза.

    1. 1
      Нетрепонемные тесты:
      • Реакция Вассермана (РСК);
      • Реакция микропреципитации (МР, РМП) и ее аналоги, которые приведены ниже;
      • Тест быстрых плазменных реагинов (RPR, РПР);
      • Тест с красным толуидином и сывороткой (TRUST);
      • Нетрепонемный тест Лаборатории исследования венерических болезней – VDRL.
    2. 2
      Трепонемные тесты:
      • Р-ция иммобилизации Treponema pallidum – РИБТ/РИТ;
      • Р-ция иммунофлюоресценции – РИФ, FTA (разведения сывороток РИФ-10, РИФ-200, РИФ-абс);
      • Р-ция пассивной гемагглютинации (РПГА, ТРПГА, TPHA);
      • Иммуноферментный анализ (ИФА, EIA);
      • Иммуноблоттинг.

    Рисунок 1 – Алгоритм серодиагностики сифилиса

    1.3.
    Гистоморфологические методы

    Эти методы сводятся к выявлению особенностей гистоморфологии сифилитических проявлений. Внимание уделяется тонкостям строения твёрдого шанкра. Однако, дифференциальная диагностика инфекции с помощью гистологии весьма затруднительна. Гистоморфология используется с другими лабораторными и клиническими тестами.

    2.
    Микроскопия Treponema pallidum в тёмном поле

    Этот метод основывается на непосредственном обнаружении бледной трепонемы в исследуемом материале с помощью микроскопа и специальных приспособлений (чаще всего отделяемое эрозий и язв, реже спинномозговая жидкость и другие субстраты).

    С помощью скарификации, соскоба, сдавливания с эрозий и язвенных дефектов получают экссудат, затем исследуют в микроскоп подготовленный препарат.

    Обычно бледные трепонемы выявляют в препарате, полученном из шанкра, из очагов вторичного свежего, вторичного рецидивного сифилиса, а также пунктата лимфоузлов, плаценты.

    Основанный на феномене свечения мелких частиц в тёмном поле при попадании луча света (феномен Тиндаля), метод прекрасно позволяет дифференцировать возбудителя сифилиса от других трепонем на основании морфологических отличий и отличий в способах передвижения бактерии.

    Для микроскопии используют специальный темнопольный конденсор соответствующего оптического разрешения. Препарат получают способом раздавленной капли (каплю материала наносят на чистое обезжиренное предметное стекло и закрывают очень тонким покровным).

    На покровное стекло капают иммерсионное масло. С помощью поворота тубуса и поворота увеличивающей линзы регулируют нужное освещение.

    В тёмном поле микроскопа обнаруживаются клетки крови, эпителиальные клетки и сам возбудитель сифилиса. Бледная трепонема выглядит как спираль, очень тонкая, излучающая серебристый цвет, с плавными движениями.

    Рисунок 2 – Темнопольная микроскопия как способ визуализации бледной трепонемы в исследуемом материале. Источник иллюстрации – CDC

    Treponema pallidum необходимо отличать от других трепонем, в том числе и Tr. refringens, которая может содержаться в ротоглотке и на слизистой половых органов. Эта бактерия совершает хаотичные движения, имеет широкие и несимметричные, довольно грубые завитки. Кроме того, Treponema pallidum отличают от Tr. Microdentium, Tr. Buccalis и Tr. vincenti.

    Визуализация бактерий в тёмном поле иногда дополняется реакцией флюоресценции. Для этого меченые флюоресцирующим красителем противотрепонемные АТ добавляют в нативный материал. При этом образуется комплекс, называемый антиген-антитело (сокращенно АГ-АТ), который и является объектом для исследования с помощью люминесцентного микроскопа.

    3.
    Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР)

    ПЦР, разработанная в 1991 году для обнаружения молекулы дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК) бледной трепонемы, является высокочувствительным и специфичным, позволяет выявить фрагменты ДНК возбудителя.

    Базируется данный анализ на копировании коротких участков ДНК бледной спирохеты, который удовлетворяет заданным параметрам и присутствует в образце. Всё это выполняется в искусственных условиях (in vitro). Реакция проводится в приборе – амплификаторе, который обеспечивает периодизацию температурных циклов. Происходит охлаждение с последующим нагреванием пробирок с погрешностью в 0,1˚С.

    ДНК-матрицу прогревают в течение 2 минут при температуре 92-98˚С (максимальная температура используется, если полимераза термостабильна). При нагревании цепи ДНК расходятся из-за распада водородных связей между ними. В стадии отжига температуру реакции снижают для связывания праймера с одноцепочечной матрицей.

    Отжиг занимает около 30 секунд, в течение этого времени синтезируются сотни нуклеотидов. Вновь синтезируемые молекулы копируются полимеразой, в результате многократно увеличиваются специфические фрагменты дезоксирибонуклеиновой кислоты. Последующая детекция фрагментов проводится с помощью электрофореза в геле агар.

    ПЦР-диагностика сифилиса пока носит экспериментальный характер, но оправдана при выявлении врождённой инфекции, в сложных диагностических случаях или при минимальном содержании бледных трепонем в исследуемом материале.

    4.
    ДНК-гибридизация

    ДНК-гибридизация выполняется in vitro и основана на полном или частичном соединении двух одноцепочечных молекул ДНК в одну молекулу. В случае полного соответствия комплементарных фрагментов объединение происходит легко. Если комплементарное соответствие частичное, то объединение цепочек ДНК происходит медленно. На основании времени слияния цепей можно оценить степень комплементарности.

    При нагреве ДНК в буферном растворе разрываются водородные связи азотистыми основаниями, являющимися комплементарными, в результате цепочки ДНК расходятся. Далее получают препарат из двух денатурированных дезоксирибонуклеиновых кислот. При охлаждении одноцепочечные участки ренатурируют. Образуется так называемый гибрид ДНК.

    Метод позволяет оценить и анализировать скорость отжига, учитывая особенности (сходства и различия) ДНК между видами или внутри вида.

    Применение ДНК-зонда заключается в гибридизации меченого фрагмента ДНК со специфичным участком ДНК для идентификации комплементарных последовательностей нуклеотидов. Для метки зонда используется группа ненасыщенных атомов (хромофоры) или радиоактивные изотопы.

    ДНК–зонд применяют для гетерогенного и гомогенного детектирования нуклеиновых кислот. Роль зонда заключается в определении участков, на которых произошло слияние мишень-зонд. Детектирование в гомогенной системе имеет преимущество – позволяет отследить гибридизацию молекул ДНК в реальном времени.

    Суть метода сводится в денатурации ДНК и ренатурации (воссоединения цепочек ДНК). Процесс ренатурации нуклеиновой кислоты и ДНК-зонда заканчивается образованием «гибрида».

    Специфические последовательности нуклеиновых кислот гибридизуются с ДНК–зондом и, таким образом, выявляются и позволяют оценить количество ДНК в исследуемом материале.

    5.
    Заражение лабораторных животных

    Высокая чувствительность кроликов к Treponema pallidum (порядка 99,9%) позволяет применять их в диагностике сифилитической инфекции.

    Заражение кроликов проводится в научно-исследовательских центрах и является «золотым стандартом» оценки чувствительности других методов.

    Вернёмся к трепонемным и нетрепонемным тестам, так как они используются чаще всего. Рассмотрим их преимущества и недостатки, а также ошибки в интерпретации результатов.

    6.
    Нетрепонемные тесты

    Это тесты определения антител IgG и IgM к стандартизированному кардиолипиновому антигену. Их существенным недостатком является сравнительно небольшая специфичность.

    Низкая стоимость и простота выполнения позволяют отнести эти тесты к отборочным диагностическим, необходимым для установки предварительного диагноза и скрининга среди населения.

    Именно нетрепонемные тесты сдаются при оформлении медицинской книжки, устройстве на работу, постановке на учет в женской консультации.

    Недостатки:

    1. 1
      Минимальная чувствительность в стадии сифилиса первичного – 70%;
    2. 2
      Минимальная чувствительность в стадии сифилиса позднего – 30%;
    3. 3
      Возможность появления ложноотрицательных и ложноположительных результатов;
    4. 4
      Трудоёмкость выполнения РСК.

    Преимущества:

    1. 1
      Относительно маленькая стоимость производства тестов;
    2. 2
      Получение быстрого ответа;
    3. 3
      Возможность их применения для скрининга.

    Получение ложноположительных или слабоположительных проб возможно в следующих случаях:

    1. 1
      Нарушение технологии выполнения, при блокировании комплекса АГ-АТ.
    2. 2
      Наличие у больного аутоиммунных заболеваний (ревматоидный артирит, ревматизм, склеродермия, системная красная волчанка, саркоидоз и др.).
    3. 3
      Злокачественные новообразования.
    4. 4
      Вирусные и бактериальные инфекции.
    5. 5
      Эндокринные заболевания (аутоиммунный тиреоидит, сахарный диабет).
    6. 6
      Беременность.
    7. 7
      Употребление алкоголя.
    8. 8
      Приём жирной пищи.
    9. 9
      Старческий возраст.

    Как видно из списка, существует достаточно причин для неверного результата. Поэтому к нему следует весьма настороженно относиться. Рассмотрим наряду с РСК ещё две пробы. Это реакция микропреципитации и VDLR (ее модификация).

    7.
    Реакция связывания комплемента (РСК, Вассермана, RW)

    Это проба, основанная на способности комплемента связываться с комплексами АГ-АТ. Идентифицируют образовавшийся комплекс с помощью гемолитической системы. Кардиолипиновый антиген заметно повышает чувствительность пробы.

    Чувствительной является и реакция Колмера, которая заключается в выполнении при различных температурных режимах. Так, первая фаза реакции Колмера протекает при температуре 20˚С в течение получаса, вторая фаза при тепературе 4-8˚С на протяжении 20-ти часов. За это время происходит связывание комплемента.

    При выполнении РСК возможно получение резко положительных результатов. Причиной, вероятно, является большой титр антител в неразведенной сыворотке. В этом случае пробы ставят с уменьшающими дозами.

    Для дифференцировки стадий сифилиса и оценки эффективности противосифилитического лечения определяют количество АТ в сыворотке.

    Позитивность пробы оценивают с помощью крестов, также в реакциях Вассермана, Колмера и Канна указывается разведение сыворотки.

    8.
    Реакция микропреципитации

    Так как трудоёмкость выполнения вышеуказанных проб велика, то для широты обхвата диспансеризацией разных групп населения разработан ускоренный способ серодиагностики сифилиса, так называемый экспресс-метод – реакция микропреципитации (сокращенно МР, РМП).

    Она выполняется с кардиолипиновым антигеном и вспомогательными веществами. Его преимуществом является забор периферической крови для исследования. Это значительно ускоряет и саму методику, и работу лаборантов.

    Рисунок 2 – Реакция микропреципитации (схема)

    Для проведения МР необходимы плазма или инактивированная сыворотка крови пациента (именно они содержат антитела). Далее плазму помещают в маркированные лунки. Затем, к исследуемому материалу добавляют каплю кардиолипинового антигена, смешивают и встряхивают. В итоге в сыворотке инфицированного появляются характерные хлопья, разные по степени интенсивности.

    Это качественная проба. При количественной оценке используются 10 разведений сыворотки, помещаемой в 10 лунок с соответствующей маркировкой. При качественной МР ответ указывается в виде крестов (плюсов) или минуса, при количественной указывается титр антител (1:2, 1:4 и так далее).

    Наличие хлопьев расценивается как положительный или слабоположительный ответ. Возможно появление флокулята и при отсутствии заболевания, поэтому окончательную оценку полученного результата проводят после контрольного исследования или проведения других реакций (РИБТ, РИФ, ИФА, РПГА).

    9.
    VDRL

    Рекомендованный Всемирной организацией здравоохранения метод постановки реакции с антигеном липоидной природы (АГ) по праву считается лучшим среди других стандартных нетрепонемных тестов. Разработан в США, штате Джорджиа в лаборатории венерических болезней (Veneral Diseases Research Laboratories).

    Аббревиатура учреждения послужила названием для пробы – VDRL. VDRL – это модификация МР. Сыворотку от больного сифилисом инактивируют и помещают на предметное стекло. Используемый антиген состоит из кардиолипина, холестерина и лецитина в разном процентном соотношении. Ответ регистрируется практически сразу.

    Отчётливая флокуляция возникает в присутствии в сыворотке антител. Сыворотка становится реактивна по прошествии 4-х недель после заражения. Для оценки количества антител, сыворотку предварительно разводят в геометрической прогрессии.

    Преимущества VDRL:

    1. 1
      сравнительно высокая чувствительность;
    2. 2
      сравнительно высокая специфичность;
    3. 3
      легкость выполнения;
    4. 4
      малая стоимость реактивов;
    5. 5
      получение быстрого ответа.

    Недостатком VDRL является относительно высокая частота ложноположительных результатов.

    Их причинами являются всё те же перечисленные выше заболевания.

    Трепонемные тесты исполняются со специфическими АГ Treponema pallidum. Они необходимы и обязательны для установления окончательного диагноза. Это реакция иммунофлюоресценции (РИФ), реакции непрямой гемагглютинации (РПГА), иммуноферментный анализ (ИФА) и др.

    После положительного результата нетрепонемного теста (RPR, MP, VDRL) всегда должны выполняться трепонемные (чаще комбинация – РПГА, ИФА, РИФ).

    Трепонемные тесты более сложны в исполнении, чем экспресс-тесты, и требуют больших затрат денежных средств.

    10.
    РИФ

    Данная реакция (сокращенно РИФ) используется для диагностики сифилиса, в том числе и скрытых форм, и перепроверки положительных и ложноположительных проб.

    РИФ основана на свечении меченых антител при соединении с комплексом антиген-антитело под кварцевой лампой. Метод начал применяться в 60-х годах и отличался простотой выполнения и высокой специфичностью (которая немного уступает РИБТ).

    Он имеет несколько модификаций: РИФ-10, РИФ-200 и РИФ-abs.

    Наиболее чувствительна РИФ в разведении 10 раз, а остальные – более специфичны. РИФ проводится в двух фазах. К АГ добавляют сыворотку крови пациента. Образуется комплекс АГ-АТ, который исследуется в следующей фазе. Далее меченный с помощью флюоохрома комплекс идентифицируют при микроскопии. Если не наблюдается свечение, это указывает на отсутствие специфических АТ в сыворотке крови.

    РИФ-200 является наиболее ценным из всех разведений. Метод предназначен для диагностики различных форм сифилиса, особенно скрытого сифилиса и перепроверки положительных проб.

    11.
    РИБТ

    Реакция иммобилизации бледных трепонем (сокращено РИБТ, РИТ) одна из сложных серологических проб, требующих значительных усилий и финансовых затрат. РИБТ применяют все реже, но актуальность ее сохраняется в диагностике скрытого сифилиса.

    Большое значение она несёт в распознавании ложноположительных результатов у беременных женщин и основывается на иммобилизации бактерий в присутствии иммобилизинов – поздних антител.

    Результат оценивается на процентном количестве (%) иммобилизированных трепонем с помощью специальной таблицы:

    1. 1
      От 0 до 20 – отрицательная проба.
    2. 2
      От 21 до 50 – слабоположительная проба.
    3. 3
      От 50 до 100 – положительная реакция.

    Ложноположительные результаты также возможны при применении РИБТ. Так, неверный ответ возможен при инфицировании тропическими трепанематозами, а также, при туберкулёзе, циррозе печени, саркоидозе и пациентов старческого возраста.

    12.
    РПГА

    Этот анализ крови на сифилис называется реакцией пассивной гемагглютинации (сокращенно, кровь на РПГА, ТРПГА).

    Антиген для РПГА приготавливают из эритроцитов барана, покрытых фрагментами бледных трепонем (полученных от инфицированных кроликов (см. рисунок 4)). Для анализа используется венозная кровь (плазма или инактивированная сыворотка) пациента.

    При добавлении антигена в сыворотку пациента с сифилисом происходит образование комплекса АГ-АТ, который приводит к агглютинации эритроцитов. агглютинация определяется субъективно врачом-лаборантом.

    Рисунок 3 – Схема РПГА (реакция пассивной гемагглютинации)

    Проба оценивается как положительная при появлении агглютинатов равномерной розовой окраски. Окрашивание преципитата в красный свидетельствует об осаждении эритроцитов. РПГА является высокочувствительной и высокоспецифичной.

    12.1.
    Реакция микрогемагглютинации

    Она является упрощённым вариантом РПГА. Отличается от пробы, описанной выше, меньшим количеством антигена, разбавителя и сыворотки крови для выполнения реакции. Через 4 часа после инкубации сыворотки можно оценить пробу. Используется при скрининговых и массовых обследованиях на сифилис.

    13.
    Иммуноферментный анализ

    Иммуноферментный анализ (сокращенно ИФА) базируется на специфической реакции антиген-антитело. Биологический материал (сыворотка крови пациента, ликвор) вносят в лунки, на твердой поверхности которых фиксированы антигены бледной трепонемы. Исследуемый материал инкубируют, затем отмывают антитела, не связавшиеся с антигенами (см. рисунок 5).

    Идентификация полученного комплекса осуществляется на этапе ферментации с помощью иммунной сыворотки, меченной ферментом. При химической реакции фермент окрашивает полученные комплексы. Интенсивность окрашивания зависит от количества специфических антител в крови пациента и фиксируется спектрофотометром.

    Рисунок 4 – Схема ИФА (иммуноферментного анализа)

    Чувствительность ИФА составляет более 95% . Метод используется в автоматизированном режиме для исследования декретируемых групп населения: доноров, беременных и других, для уточнения диагноза при положительных и ложноположительных нетрепонемных тестах.

    14.
    Иммуноблоттинг

    Иммуноблоттинг – высокочувствительный метод, модификация простого ИФА. Реакция основана на электрофорезе с разделением антигенов бледных трепонем.

    Разделенные иммунодетерминанты переносят на нитроцеллюлозную бумагу и проявляют в ИФА. Далее инкубируют сыворотку и смывают не связавшиеся антитела. Полученный материал обрабатывают иммуноглобулинами (IgМ или IgG), меченными ферментом.

    15.
    Клиническая оценка результатов лабораторной диагностики сифилиса

    В таблице 1 ниже мы привели возможные результаты анализов и их расшифровку. Как можно видеть в таблице, основное значение при расшифровке имеет комплексная оценка тестов.

    Таблица 1 – Расшифровка результатов серологических реакций (анализов крови на сифилис). Для просмотра кликните по таблице

    Оценка реактивности тестов выполняется также «крестами»:

    1. 1
      Максимальный ответ (резко положительная проба) обозначается с помощью 4-х крестов.
    2. 2
      Положительная проба обозначается с помощью 3-х крестов.
    3. 3
      Слабоположительную реакцию обозначают двумя крестами.
    4. 4
      Один крест свидетельствует о сомнительном и отрицательном результате.
    5. 5
      Отрицательный ответ маркируют знаком «минус».

    Проблема оптимизации лабораторной диагностики сифилиса не потеряла свою актуальность до настоящего времени. Современные методы диагностики, несмотря на стремление учёных привести диагностику к максимально высоким показателям чувствительности и специфичности, требуют контрольной проверки и индивидуального подхода.

    Особенностью сифилитической инфекции является феномен серорезистентности, который так и не получил научного объяснения. Диагноз выставляется после полноценного обследования больного эпидемиологическими, клиническими, лабораторными методами.

    На фоне экономико-технического развития медицины наблюдается и прогресс в разработке новых критериев диагностики сифилиса. Всё это позволит быстро, успешно и безошибочно лечить пациентов.

2.
Микроскопия Treponema pallidum в тёмном поле

С помощью скарификации, соскоба, сдавливания с эрозий и язвенных дефектов получают экссудат, затем исследуют в микроскоп подготовленный препарат.

Обычно бледные трепонемы выявляют в препарате, полученном из шанкра, из очагов вторичного свежего, вторичного рецидивного сифилиса, а также пунктата лимфоузлов, плаценты.

Основанный на феномене свечения мелких частиц в тёмном поле при попадании луча света (феномен Тиндаля), метод прекрасно позволяет дифференцировать возбудителя сифилиса от других трепонем на основании морфологических отличий и отличий в способах передвижения бактерии.

Для микроскопии используют специальный темнопольный конденсор соответствующего оптического разрешения. Препарат получают способом раздавленной капли (каплю материала наносят на чистое обезжиренное предметное стекло и закрывают очень тонким покровным).

На покровное стекло капают иммерсионное масло. С помощью поворота тубуса и поворота увеличивающей линзы регулируют нужное освещение.

В тёмном поле микроскопа обнаруживаются клетки крови, эпителиальные клетки и сам возбудитель сифилиса. Бледная трепонема выглядит как спираль, очень тонкая, излучающая серебристый цвет, с плавными движениями.

Рисунок 2 – Темнопольная микроскопия как способ визуализации бледной трепонемы в исследуемом материале. Источник иллюстрации – CDC

Treponema pallidum необходимо отличать от других трепонем, в том числе и Tr. refringens, которая может содержаться в ротоглотке и на слизистой половых органов. Эта бактерия совершает хаотичные движения, имеет широкие и несимметричные, довольно грубые завитки. Кроме того, Treponema pallidum отличают от Tr. Microdentium, Tr. Buccalis и Tr. vincenti.

Визуализация бактерий в тёмном поле иногда дополняется реакцией флюоресценции. Для этого меченые флюоресцирующим красителем противотрепонемные АТ добавляют в нативный материал. При этом образуется комплекс, называемый антиген-антитело (сокращенно АГ-АТ), который и является объектом для исследования с помощью люминесцентного микроскопа.

Как расшифровывается РПГА анализ крови и каким образом к нему подготовиться?

Своевременно проведённый анализ выявляет патологию на ранней стадии развития, что облегчает борьбу за здоровье пациента. Не каждый обыватель знает, что за анализ РПГА указан в бланках с результатами, и как его расшифровать.

Получить направление на анализ крови с аббревиатурой РПГА может любой человек, так как это распространённое исследование для людей, которым необходимо пройти медицинскую комиссию для трудоустройства либо перед операцией. Необходимо женщинам, планирующим встать на учёт по беременности.

Для того чтобы тест-система показала верные результаты, пациенту необходимо тщательно подготовится к исследованию:

  1. Последний прием пищи должен быть не позже 20 часов вечера. Накануне сдачи крови желательно употреблять продукты с минимальным количеством жиров. Тяжелая пища может способствовать получению ложноположительного или ложноотрицательного результатов. В этом случае пациенту придется пересдавать кровь на повторное исследование.
  2. Забор крови проводится утром, поскольку многим пациентам сложно обойтись без пищи длительное время.
  3. Перед посещением лаборатории запрещается курить, пить кофе и чаи. Вещество, содержащееся в табачном дыме и попавшее в кровь, может привести к получению ложноположительного или отрицательного результатов.
  4. Врачи не рекомендуют непосредственно перед сдачей анализов физически перегружать организм. Запрещено заниматься силовыми тренировками, избегать стрессовых ситуаций.
  5. За несколько дней до процедуры забора крови необходимо полностью отказаться от алкогольных напитков. Спирт может привести к искажению результатов и получению неверных значений.
  6. Перед сдачей анализов допускается выпить небольшое количество чистой питьевой воды без содержания газов.

4.
ДНК-гибридизация

ДНК-гибридизация выполняется in vitro и основана на полном или частичном соединении двух одноцепочечных молекул ДНК в одну молекулу. В случае полного соответствия комплементарных фрагментов объединение происходит легко. Если комплементарное соответствие частичное, то объединение цепочек ДНК происходит медленно. На основании времени слияния цепей можно оценить степень комплементарности.

При нагреве ДНК в буферном растворе разрываются водородные связи азотистыми основаниями, являющимися комплементарными, в результате цепочки ДНК расходятся. Далее получают препарат из двух денатурированных дезоксирибонуклеиновых кислот. При охлаждении одноцепочечные участки ренатурируют. Образуется так называемый гибрид ДНК.

Как расшифровывается РПГА анализ крови, назначение и подготовка к анализу

Метод позволяет оценить и анализировать скорость отжига, учитывая особенности (сходства и различия) ДНК между видами или внутри вида.

Применение ДНК-зонда заключается в гибридизации меченого фрагмента ДНК со специфичным участком ДНК для идентификации комплементарных последовательностей нуклеотидов. Для метки зонда используется группа ненасыщенных атомов (хромофоры) или радиоактивные изотопы.

ДНК–зонд применяют для гетерогенного и гомогенного детектирования нуклеиновых кислот. Роль зонда заключается в определении участков, на которых произошло слияние мишень-зонд. Детектирование в гомогенной системе имеет преимущество – позволяет отследить гибридизацию молекул ДНК в реальном времени.

Суть метода сводится в денатурации ДНК и ренатурации (воссоединения цепочек ДНК). Процесс ренатурации нуклеиновой кислоты и ДНК-зонда заканчивается образованием «гибрида».

Специфические последовательности нуклеиновых кислот гибридизуются с ДНК–зондом и, таким образом, выявляются и позволяют оценить количество ДНК в исследуемом материале.

Оцените статью
relax-irkutsk.ru
Adblock detector